冷冻离心机预冷

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1、3)冰乙酸:甲醛（1:3）4)Transwell小室(BD,Bioscience)5)Matrigel基质胶（BD,Bioscience，50ug/ml）：商品化，保存-20°。6)各种规格的枪头、5ml离心管及10ml玻璃离心管：高温灭菌后备用，其中准备一些枪头与5ml的离心管于-20ºC预冷，备用。7)5810R台式高速冷冻离心机（Eppendorf），。

2、3 实验试剂 硫氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、聚乙烯吡咯烷酮（pvp）、甲硫氨酸（Met）、NBT、核黄素、蔗糖、蒽酮、乙酸乙酯、浓硫酸等。2 实验方法 2.1 大蒜中超氧化物歧化酶提取以及超氧化物歧化酶活性测定 2.1 粗提取方法取脱毒大蒜 10g 于预冷的研钵中，加适量提取介质在冰浴下研磨。

3、（4） 连接后的产物可以立即用来转化感受态细胞或置4°C冰箱备用。大肠杆菌感受态细胞的制备细菌转化器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，50ml 微量离心管，5ml 微量离心管，台式冷冻离心机，制冰机，恒温摇床，分光光度计，超净工作台，恒温培养箱，摇菌试管，三角烧瓶，接种环，恒温摇床，。

4、(3) 将上清液转入小烧杯中,放入冰盐浴(没有水的碎冰撒入少量食盐),逐滴加入等体积预冷至-20℃的95%乙醇,同时轻轻搅拌,共需30分钟,再在冰盐浴中放置10分钟,以沉淀完全。于4℃,10000rpm,离心10min,倾去上清,并滴干,沉淀保存于离心管中,盖上盖子或薄膜封口,然后将其放入冰箱中冷冻保存(称为“级分Ⅱ”)。

5、9. 用 300 µL 70% 预冷的乙醇洗涤沉淀，离心（12000 r/min，15 min，4℃），弃上清，再离心几秒，用移液器彻底除去酒精，风干；10. 沉淀溶于 100 µL TE 溶液中，-20℃保存；1 以紫外分光光度法和 0.8% 琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 浓度和质量。DNA的浓缩与纯化： 将样品。

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1、2、37℃振荡培养过夜。3、取5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3min，弃上清液。4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8.0，25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合。5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。6、加入0.15m1预冷溶液III(5 mol。

2、2.加入4mL提取液，快速振荡混匀 3.加入等体积的4mL的氯仿:异戊醇(24:1)，涡旋3～5min（此处是粗提没有加酚，可以节约成本的哟！）4.1000rpm，4℃，5min 5.上清用体积的氯仿:异戊醇(24:1)再抽提一次（10,000 rpm，4℃离心5 min）6.取上清，加入2/3倍体积的-20℃预冷异丙醇或2.5倍。

3、研钵、移液器、容量瓶（100 mL）、离心管、试管、高速冷冻离心机、分光光度计、通风橱。（三）试剂 1．-20℃预冷丙酮 2．浓氨水 3．2 mol/L硫酸取10 mL浓硫酸，稀释到90 mL。4．10%（v/v）四氯化钛-盐酸溶液在通风厨中，将10 mL四氯化钛，缓慢加入到90 mL盐酸中。轻轻地在操作台上平摇。

4、原理:分离要用的主要试剂是层析液。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。层析分离叶绿体中的色素：将纸条画有滤液细线的一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不要将滤液细线浸没在层析。

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